
Голоборщева Валерия
Владимировна
к.м.н. / врач КЛД
младший научный сотрудник


Документы
Работа с генетически модифицированными лабораторными животными в GLP-виварии
(разведение/поддержание колоний)
Проведение хирургических операций на мышах (вазэктомия самцов, перфузия, изъятие эмбрионов у беременных самок, забор необходимых органов, взятие крови из подъязычного синуса, ретроорбитального венозного сплетения, сердца и хвостовой вены)
• Генотипирование трансгенных и нокаутных мышей методом ПЦР с детекцией ДНК-фрагментов в агарозном геле, а также методом количественной ПЦР в режиме реального времени (qPCR)
• Выделение суммарной РНК из биологических образцов коммерческими наборами, постановка реакции синтеза цепи кДНК, оценка уровня экспрессии генов методом количественной ПЦР (qPCR), подбор референтных генов и праймеров для анализа
Планирование и выполнение научно-исследовательских работ по тестированию новосинтезированных препаратов на генетических моделях нейродегенеративных заболеваний человека, проведение наблюдений, измерений и последующих поведенческих тестов (перевёрнутая сетка, тест на вертикальном шесте, анализ двигательной активности на высокотехнологичной установке CatWalk XT10 и др.)
• Приготовление, фиксация и окрашивание мазков крови лабораторных животных, гематологический анализ клеток крови нокаутных мышей и мышей дикого типа
• Заключение проведенных через батарею спиртов и хлороформ биологических образцов в парафиновые блоки и приготовление гистологических срезов.
• Проведение иммуногистохимического окрашивания с использованием антител, меченых флуоресцентным или биотиновым красителем
• Выполнение стереологического подсчёта клеток во всей исследуемой анатомической области для морфометрического анализа
• Владение навыками конфокальной и эмиссионной микроскопии
• Статистическая обработка данных в программах Statistica, Excel, GraphPad Prism, построение репрезентативных графиков
ДОПОЛНИТЕЛЬНО - коллективное участие в следующих методиках:
• Стереотаксические инъекции в заданные анатомические области головного мозга генетически модифицированных животных
• Перенос пронуклеусов и бластоцист, полученных от скрещивания трансгенных мышей, в самок-реципиентов дикого типа
• Вестерн-блоттинг